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HPLC基礎講座——色譜柱的清洗與保管技巧

更新時間:2025-09-25瀏覽:341次

在日常的液相色譜(HPLC)分析中,色譜柱是實驗室中最寶貴的“消耗品"。正確的清洗與保管方法,不僅能延長色譜柱的使用壽命,還能幫助我們避免許多常見的分析問題。今天,就讓我們一起來了解色譜柱的維護要點吧!

一、 為什么要清洗色譜柱?
1、避免柱效下降:緩沖液、離子對試劑、酸等成分容易殘留在柱內,若不清洗會加速柱子老化。

2、防止分析問題:如壓力升高、峰形異常、鬼峰(Ghost peak)出現等,很多情況下都與柱內雜質沉積有關。

因此,當使用可能導致柱劣化的流動相時,必須進行清洗!

二、 日常使用時的清洗方法

1、使用相同成分且不含可能導致變質的成分(緩沖液、離子對試劑、酸等)的流動相清洗 15至30 分鐘。

2、如果長期存放,請更換為出廠時使用的流動相。

例如使用 甲醇/20 mmol/L 磷酸緩沖液 = 20/80 的條件時,可以這樣操作:

1)  甲醇/水 = 20/80 清洗約 15 分鐘。

2) 若一周內繼續使用,密封保存即可。

3、若一周以上不使用,需切到出廠的保存溶液(甲醇/水 = 70/30,再密封保存。

這樣做能確保柱子在下次使用時狀態穩定。

三、 出現問題時的清洗方法

用可溶解任何吸附雜質或沉淀樣品/鹽的溶劑清洗 30 至 60 分鐘。 請勿使用堿性溶液或強酸,因為它們可能會損壞色譜柱。

1、疏水性化合物吸附

先用甲醇清洗 30 分;若無改善,再嘗試更強的溶(如 THF、仿)。

2、鹽析出現:

先用水沖洗 30 分;再用甲醇/水體系清洗 15 分

注意:避免使用強酸或堿性溶液,以免損傷色柱。

四、 色譜柱的保管方法

1、短期保管:用分析的流相密封即可。

2、期保管:建議換成出廠保存液(如 ACN/水 = 70/30)后再密封保存。

點:

1、使用有機溶劑濃度較高的條件保存,能有效防止微生物滋生。

2、每次停用前檢查是否需要清洗,避免因殘留緩沖液或酸性條件導致柱子損壞。

五、 總結

1、色柱是消耗品,但正確的清洗與保管能大幅延壽命。

2、色使用緩沖液、酸性流動相時,一定要進行適當清洗。

3、出現問題時,選擇合適的溶劑進行針對性處理。

4、期保存使用推薦的出廠保存液。

一起養成良好的柱子維護習慣每一次HPLC分析都更加順暢、高效!


 

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